图片 1

这4点是影响猪精液保存的关键因素

图片 1

我国自1950年以来,猪的人工授精技术已经渐渐地普及开来,经过不断的研究,目前此项技术已较为完善,大大提高了公猪的配种效能,加速了改良品种的增殖,并且在一定程度上防止了疫病的传播[1]。

猪新鲜精液常温保存的时间愈长愈可以扩大精液使用的时间和地域范围,提高优秀种公猪的利用效率,从而降低公猪饲养成本,加速猪的遗传改良,避免通过交配传播疾病。生产上影响精液质量的关键因素分别是温度、渗透压、PH值、污染、时间等,因此在精液的采集、加工、储存和使用时应注意:

人工授精技术之所以能够得到如此广泛的推广与应用,这当中自然离开不了精液保存技术的研究与发展。一般来说,公猪精液的保存方法分为常温或低温保存和冷冻保存两种。我国对公猪精液保存的研究已经逐渐成熟。据1976年资料统计[1],广西、广东、上海、江苏、山东、陕西、北京等地有近百万头母猪接受了常温保存精液人工授精,受胎率达到了80%;1986年,广西、北京、四川、黑龙江等6个省市的统计数字表明[2],冷冻精液累计配种母猪6万余头,第一情期受胎率达70%以上;2003年,李青旺等[3]经研究获得了53%的公猪冷冻精液冻后活率。本文将结合近年来国内外关于公猪精液保存的最新研究成果,详细论述公猪精液的常温保存和冷冻保存两种保存方法的研究进展。

1、防止温差变化;

1 常温保存

2、保持正确的渗透压和PH值;

1.1 操作方法

3、消除各种外界污染的可能,通过使用一次性耗材来防止交叉感染和疾病传播;

精液稀释前,多用纱布将精液的胶状物质过滤掉,由于精液包含精子和精清,精清中的电解质成分会促进精子早衰[4]。周歧生等[5]实验表明,精子采出后立刻稀释,或者静置0.5h和1.5h后再稀释,精子的抵抗力和保存效果均不如静置1h后稀释的效果好,可见精清对精子的影响有好有坏,关键是要控制好静置的最佳时间。另外,有人利用离心的方法将精清与精子分离后再加入稀释液,此方法比未经处理的精液的受胎率提高了61%[6]。

4、必须确保使用时是高质量的精液。

1.2 保存温度

一、防止温差变化

研究表明[7],在精子体外存活的环境因素中,温度相当重要,较低的温度能够降低精子的能量消耗和有害代谢物生成。但许多研究人员对温度的要求有着各自不同的观点。周歧生等[5]认为8℃~10℃对保存精子有利,而12℃~15℃温度则稍高,有利于细菌的繁殖。霍秀香[8]在猪精液保存方法试验中发现,梅山猪、约克夏猪精液保存15℃极明显好于10℃、20℃、25℃。董载勇等[9]的配方筛选试验也显示了在16℃~18℃恒温保存时,精子的总存活时间和生存指数都较好。Verno
Pursel则认为15℃以上的贮存温度能够很好地保存精子的受精力。目前,大量有关温度影响的试验仍在不断进行,所以如何寻找一个适宜精子生存和保持其受精力的温度,成为今后研究的一个方向。

1.稀释液温度的变化必须缓慢,不能超过每5分钟1度的速度;

1.3 稀释液配方

2.在精液温度下降到32度以前,混合精液和稀释液;

稀释液的配方一般要满足以下几点要求:1、对精子无侵害作用;2、能供给精子营养;3、酸碱环境适合精子生存;4、渗透压适当;5、原料价格合适、配置简便[10]。

3.当混合时,精液和稀释液必须等温;

稀释液的配方成分一般为葡萄糖、EDTA、卵黄、抗生素、碳酸氢钠或者柠檬酸钠和某些添加剂。有研究人员[5]认为用蜜糖代替葡萄糖效果更好,这是由于蜜糖中含葡萄糖、果糖、蔗糖和其他营养成分,并且有抗菌效果,价格低,蜜源丰富。EDTA是稀释液中相当重要的一个成分,它是一种螯合剂,能够与稀释液中的Ca2
+等有害金属离子结合成稳定的络合物,增加精子的存活率[5,11]。碳酸氢钠或者柠檬酸钠可用来调节精液的PH值,研究发现[5]PH在5.8较适宜,因为精子本身PH值在7.0~7.5之间,为弱碱性,只有在弱酸性的环境中才能降低其代谢率,延长其寿命。稀释用水一般为双蒸水,但是它费用昂贵,季本林等[12]进行了用自来水、自制双蒸水、天然降水、井水等来充当稀释用水的实验,结果发现天然降水(煮沸沉淀时24h的上清液)做成的稀释液与双蒸水的效果差异不显著,精子存活率、受胎率及产仔数均未下降。

这4点是影响猪精液保存的关键因素。4.混合后,精液的温度继续慢慢下降,然后放在17度的恒温冰箱中保存;

此外,稀释液中一定的渗透压是维持精子存活的必要条件,猪精子可耐受的渗透压为240
mosM~380mosM,稀释液的渗透压主要由非离子物质维持[11]。精子对一定范围以内的渗透压都能适宜,但在其他条件都相同的情况下,精子更适应高渗透压,因为较低的渗透压更容易破坏精子的顶体。

5.人工授精实验,室内温度控制在22-24度。

1.4 稀释液中的添加成分

二、保持正确的渗透压和PH值

精子呼吸代谢能产生活性氧族,携带有氧自由基,造成过氧化损伤,这是受精能力下降的重要原因。因此添加抵抗自由基的成分是十分必要的[11]。半胱氨酸、维生素E均有抗氧化的功效。近来研究发现褪黑激素有较强的抗自由基的作用,还可增加谷胱甘肽氧化酶的活性,还可通过对调节抑制基因bel-2的调控作用而控制细胞程序化死亡,延缓精子的衰老。马忠兰[13]在稀释液中(葡萄糖、柠檬酸钠碳酸氢钠、EDTA钠、Tris,柠檬酸、半胱氨酸,BSA)加入1×105mol/L的褪黑激素,使精液保存时间延长至6天。钱盾元等[14]将精子置于0℃冰箱内低温保存,在基础液中加入低温保护剂(4%的卵黄和2.5%的脱脂鲜奶),保存效果比不添加低温保护剂平均高了120小时,说明卵黄和脱脂鲜奶同时使用,能在低温下对精子起到保护作用。

为了保持合适的渗透压,使用的水必须纯净,不含任何杂质,最好用双蒸水配置。蒸馏水可以在当地购买,也可以用双蒸水机自己制作。

精子在采集和保存的过程中,不可避免地会受到一些污染物的影响,用青霉素、链霉素或者庆大霉素添加于稀释液中,可以提高对有害细菌的杀灭能力,从而提高了精子的保存活性。

发表评论